準(zhǔn)備室
微生物實(shí)驗(yàn)室良好的通風(fēng)是關(guān)鍵,必要時(shí)更應(yīng)配備抽風(fēng)機(jī)。接種、分離及鑒定致病菌等操作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行,為了防止交叉污染,保護(hù)工作人員健康,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)至少劃分成3個(gè)區(qū)。
準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過(guò)的器皿已被微生物污染,有時(shí)還會(huì)存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,應(yīng)該設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施。
無(wú)菌室
無(wú)菌室也稱接種室,是系統(tǒng)接種、純化菌種等無(wú)菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室。在微生物中,菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作,這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對(duì)接種工作干擾很大。
1.無(wú)菌室的設(shè)置
無(wú)菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來(lái)設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn):
①無(wú)菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無(wú)菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過(guò)大,以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)有天花板。
②內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,以減少空氣的波動(dòng),門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上;外間的門應(yīng)該也用拉門,要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上?! ?/span>
③在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應(yīng)開(kāi)一個(gè)小窗,作接種過(guò)程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇。
④無(wú)菌室容積小而嚴(yán)密,使用一段時(shí)間后,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置),應(yīng)該為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開(kāi)啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)?! ?/span>
2.無(wú)菌室內(nèi)設(shè)備和用具
①無(wú)菌室內(nèi)的工作臺(tái),不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺(tái)面水平。
②在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
③外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來(lái)蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
④內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。
3.無(wú)菌室的滅菌消毒
①薰蒸:這是無(wú)菌室徹底滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間,污染比較嚴(yán)重時(shí),應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌??捎眉兹⑷樗峄蛄蚧寝拐?。 ②噴霧:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng),并有殺菌作用??捎?%石炭酸噴霧。
③紫外線照射:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開(kāi)啟紫外線燈照射30~60min?! ?/span>
4.無(wú)菌室工作規(guī)程
①無(wú)菌室滅菌。每次使用前開(kāi)啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧?! ?/span>
②用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘?! ?/span>
③將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位,用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進(jìn)內(nèi)室工作。
④接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí),動(dòng)作要輕緩,盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。
⑤工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴(kuò)大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí),浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
⑥工作結(jié)束,立即將臺(tái)面收拾干凈,將不應(yīng)在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后,對(duì)無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧,或開(kāi)紫外線燈照射30min。
恒溫培養(yǎng)室
1.培養(yǎng)室的設(shè)置
①培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內(nèi)室面積在3.2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1.8=6m2左右,高以2.5m左右為宜,都應(yīng)有天花板。
②分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過(guò)濾裝置的通風(fēng)口。
③為滿足微生物對(duì)溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機(jī)。
④內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈,以供滅菌用。
2.培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具
①內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)(搖床)。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。
②外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
3.培養(yǎng)室的滅菌消毒
①同無(wú)菌室的滅菌、消毒措施。
②小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。
普通實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室
進(jìn)行微生物的觀察、計(jì)數(shù)和生理生化測(cè)定工作的場(chǎng)所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點(diǎn)不同而有很大的差異。一般均配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)要求平整、光滑,實(shí)驗(yàn)柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。
清潔區(qū)
包括辦公室、休息室、培養(yǎng)基配制室與試劑儲(chǔ)藏室。此區(qū)域禁止帶入細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本。
操作區(qū)操作區(qū)
1.整潔:
微生物操作區(qū)是各種病原菌相對(duì)集中的地方,為了減少粉塵流動(dòng),防止交叉污染,操作區(qū)應(yīng)與外界分開(kāi)。實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)入操作區(qū)應(yīng)換鞋,送標(biāo)本人員不進(jìn)入操作區(qū),操作區(qū)地面用專用拖把每天拖1次,每周用消毒劑擦洗1次。每天早上工作前,用紫外線照射30min,或每天工作后,用紫外線照射60min,對(duì)整個(gè)操作區(qū)進(jìn)行消毒;下午工作結(jié)束后用消毒液消毒工作臺(tái)面,以保證工作環(huán)境的安全清潔。
2.光線:
細(xì)菌培養(yǎng)的細(xì)小菌落及血清試驗(yàn)?zāi)w粒的觀察,都需要有充足的光線。操作區(qū)除設(shè)置常規(guī)照明燈外,還必須安裝操作臺(tái)燈,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確判斷。
3.通風(fēng):
由于各種病原菌集中,空氣污濁,實(shí)驗(yàn)室要求保持良好的通風(fēng)。
4.溫度和濕度:
由于無(wú)菌操作的要求,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中經(jīng)常使用酒精燈,因此,微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室不能安裝吊扇。為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需的適宜溫度,尤其是滿足某些儀器對(duì)溫度濕度的要求,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝空調(diào)。
5.電源:
要求提供穩(wěn)壓、恒頻的電源;根據(jù)儀器設(shè)備要求,必要時(shí)配備不間斷電源。
6.水源:
操作區(qū)內(nèi)須設(shè)置水源。用于標(biāo)本處理(如細(xì)菌染色)的水槽與工作人員洗手用的水槽不能混用。
7.污染物處理:
操作區(qū)須備有消毒缸,以處理沾有活菌的玻片等污染物品。檢驗(yàn)剩余的標(biāo)本及使用過(guò)的帶菌平板、試管均須集中地點(diǎn)安全放置,經(jīng)消毒滅菌處理后再洗滌或丟棄。無(wú)菌
無(wú)菌室
1.無(wú)菌室應(yīng)完全封閉,進(jìn)出無(wú)菌室至少要經(jīng)兩道門,中間隔有緩沖間,無(wú)菌室與外間設(shè)置一個(gè)可開(kāi)閉的窗口,用于傳遞器具。
2.無(wú)菌室必須保持整潔。工作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)換專用鞋、專用衣。無(wú)菌室使用前須用紫外線消毒30min,操作結(jié)束后清潔臺(tái)面,再用紫外線消毒30min。定期用乳酸或甲醛熏蒸,徹底消毒。
3.無(wú)菌室僅用于培養(yǎng)基分裝等無(wú)菌操作,不能進(jìn)行有菌標(biāo)本的操作。操作人員操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格關(guān)門,并戴好專用的口罩、帽子。
4.無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)有空氣過(guò)濾裝置,并安裝空調(diào)。